武汉科锐诺生物(查看)-胞外囊泡粒径及浓度服务

外泌体中包含mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等多种RNA分子，不同类型细胞所分泌的外泌体包含的RNA分子不同，这些RNA分子以外泌体为载体进入靶1细胞后，会通过不同的机制对靶1细胞产生影响。通过高通量测序技术分析外泌体RNA分子差异，是对外泌体RNA功能研究的有效手段。

      表观生物在提取高纯度外泌体总RNA分子基础上，为外泌体研究提供专1业高通量测序服务，采用全新文库构建技术，可获得mRNA、lncRNA、circRNA及miRNA等丰富信息，全1面提升外泌体研究深度及广度。

测序平台：Illumina HiSeq X10/Hiseq 4000

测序模式：PE150

适用物种：人、大小鼠

 样本类型：血1清/血浆、培养基上清、尿液、唾液等

 样本分组建议：10 VS 10

外泌体分离提取方案。主要方案包括：

1、差速超1速离心法；

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；

2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法；

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；

3、超滤提取法；

适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。

外泌体是细胞外囊泡的一种，胞外囊泡粒径及浓度服务，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、NTA检测（粒径及浓度鉴定）、WB（分子标志物）。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。

外泌体miRNA的主要优势：

1.外泌体是由活1细胞分泌的，代表了活1细胞内部的状态与通信信息输出，因此是较好的诊断疾病的生物标志物的载体；

2.miRNA装入外泌体或微囊泡中，有包膜包被，可保护不被降解，稳定存在于体液中；

3.外泌体在大部分体液中均存在，可反应人体的正常生理和病理状态。

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